什么是fc融合蛋白?

 

Fc融合蛋白是一种由免疫球蛋白(如IgG、IgA等)的Fc片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将Fc区域与其他蛋白质或肽段融合,可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能,同时利用Fc区域的稳定性和免疫系统的Fc受体相互作用,增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如,普通重组IL-2的体内半衰期较短,只有6.9分钟,这限制了其在体内的持续作用时间。然而,通过与免疫球蛋白的Fc片段融合,重组IL-2/Fc融合蛋白在体内半衰期延长了近700倍,从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外,延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率,减少潜在的副作用和毒性。


 

融合蛋白有哪些?

 

融合蛋白是一种由至少两个结构域组成的蛋白,这些结构域由被连接起来的独立基因编码,因此能够作为一个单元被转录和翻译,产生单克隆多肽。现在几乎所有的重组蛋白都是利用融合结构域制备,也被称为“标签”(参阅重组蛋白标签的完整列表)。因此,融合蛋白又称融合标签蛋白或嵌合蛋白。

 

大体上有两种类型的融合蛋白:种是由两个蛋白或蛋白亚单位端对端融合,通常由一个linker连接,第二种是来自两个供体的氨基酸穿插在融合蛋白产物中。

 

融合蛋白应用:

 

融合蛋白重要的三个用途是:

 

1.作为克隆基因纯化的辅助手段

 

2.作为的表达水平

 

3.作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或生物体中的位置可视化

 

融合蛋白在纯化中可以通过亲和层析简单方便地纯化,如葡萄球菌蛋白A、谷胱甘肽-S-转移酶(gst)、麦芽糖结合蛋白(mbp)和纤维素结合蛋白。 重组融合蛋白常用作构建体的融合伙伴,包括 β-半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白 (GFP)。

 

荧光融合蛋白

 

在融合蛋白中,多的一类称为荧光蛋白,如绿色荧光蛋白(GFP)、橙色荧光蛋白(OFP)和黄色荧光蛋白(YFP)。 绿色荧光蛋白 (GFP) 等荧光蛋白能够直接观察动态细胞内过程。

 

绿色荧光蛋白(GFP)是一种荧光蛋白,初是从水母维多利亚发光管中分离出来的。 与荧光素酶不同,GFP 具有不需要任何底物、荧光素以及 ATP、O2 或 Mg2+ 的优势。 GFP 在被蓝光或紫外线激发时会发出绿光,在许多情况下可用于活的、完整的细胞和生物体,从而确保 GFP 作为自发荧光蛋白的功能。

 

融合蛋白标签

 

在融合标签中,既有短序列(如 PolyHis、PolyArg、FLAG、c-Myc、Streptag 等),也有大蛋白(GST、MBP 等)。 在许多情况下,短序列不会影响分子的三级结构及其生物学特性,而大融合分子更常用于增强所需蛋白质的溶解度。 与短序列标签不同,需要从重组构建体中去除大的融合标签。

 

有许多融合标签,既包含经过充分验证的标签,也包含近开发的具有各种特性和不同优缺点的标签。