融合蛋白和重组蛋白的区别有哪些?一分钟让你了解:
重组蛋白是什么?重组蛋白是利用基因工程技术产生的,通常是由转基因动物的乳腺产生,其作为生物制药在医学领域中作用显著。
利用基因工程技术,可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。
方法:是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品,因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。
融合蛋白是什么?
融合蛋白又称为“标签蛋白”,常用的标签有His、GST、Strep标签。
融合蛋白是通过DNA重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连,通过这种方式表达出来的蛋白质,就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。
融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。
大体上有两种类型的融合蛋白:种是由两个蛋白或蛋白亚单位端对端融合,通常由一个linker连接,第二种是来自两个供体的氨基酸穿插在融合蛋白产物中。
重组融合蛋白的应用
①蛋白融合技术的应用
融合蛋白的三个重要的应用:
1. 有助于克隆基因纯化
2. 体现表达水平
3. 作为组织化学标签,使蛋白在细胞、组织或生物体中的位置可视化
融合蛋白,如葡萄球菌蛋白A、谷胱甘肽-S-转移酶(gst)、麦芽糖结合蛋白(mbp)和纤维素结合蛋白,在纯化时可以通过亲和色谱法轻松方便地进行纯化。重组融合蛋白常被用作结构的融合伴侣是β-半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白 (GFP)。
②荧光融合蛋白
在融合蛋白中,常见的一类是荧光蛋白,如绿色荧光蛋白(GFP)、橙色荧光蛋白(OFP) 和黄色荧光蛋白(YFP)。荧光蛋白,如绿色荧光蛋白 (GFP),使人们能够直接观察细胞内的动态过程。
绿色荧光蛋白(GFP)是一种荧光蛋白,初从维多利亚水母的发光器官中分离出来。与荧光素酶不同,GFP的优势在于它不需要任何底物、荧光素,以及ATP、O2或Mg2+。GFP在被蓝光或紫外光激发时发出绿光,且在许多情况下可用于活的、完整的细胞和生物体,正是因为GFP作为自发荧光蛋白的功能。
③融合蛋白标签
在融合标签中,既有短序列(例如PolyHis、PolyArg、FLAG、c-Myc、Streptag等)也有大蛋白(GST、MBP 等)。在许多情况下,短的序列不影响分子的三级结构及其生物特征,而大的融合分子更经常用于提高所需蛋白的溶解度。与短序列的标签不同,有必要将大的融合标签从重组蛋白中去除。
我们有许多融合标签,其中既包含已被证实的标签,也包含近开发的具有不同特点和不同优缺点的标签。