免疫印迹（WB）、免疫组化（IHC）、酶联免疫吸附试验（ELISA），是免疫学三大常用工具，分别应用于定位、定性和定量。
一、免疫印迹（WB）
WB 简介
先要进行 SDS-PAGE，然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上，而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品，可以用于定性和半定量。
实验原理：
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，是一种能对蛋白进行定性和半定量分析的方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳分离的细胞或生物组织样品中的蛋白条带进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况。
该技术与Southern或Northern杂交方法类似，但采用的是SDS-PAGE凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
实验流程：
蛋白样本制备→SDS-PAGE→转膜→封闭→抗体孵育→显色及成像分析
应用：
1）定性检测：目的蛋白有无、分子量大小、蛋白修饰
2）半定量检测：目的蛋白表达差异
二、酶联免疫吸附试验（ELISA）
ELISA 简介
用到了免疫学原理和化学反应显色，需要将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，这就是 「吸附」的含义。
实验原理
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。该技术以免疫学反应为基础，通过将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行。ELISA技术将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种, 常见的有直接法（A）、间接法（B）、双抗体夹心法（sandwitich，C）以及间接夹心法(D)等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
实验流程：
生物样本制备→蛋白浓度测定→酶标板包被→孔板封闭→加待测样，温育，洗涤→加酶标抗体，温育、吸毒→加底物，温育显色→加终止液，读取OD值
应用
生物样本中抗体或抗原性物质的定性定量；
三、免疫组化（IHC）
IHC 简介
融合了免疫学原理 (抗原抗体特异性结合) 和组织学技术 (组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色，来对组织 (细胞) 内抗原进行定位、定性及定量的研究 (主要是定位)。
实验流程如图：
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