什么是流式细胞术？
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是在流式细胞仪的基础上，对处于快速直线流动状态的单列细胞或生物颗粒进行逐个、多参数、快速定性、定量分析的一种高新技术，具有高通量、多参数、速度快，采集数据量大、操作灵活等优点。开始检测单细胞内DNA、RNA含量，蛋白质或线粒体等大分子结构和细胞动力学，到如今拓展到细胞表面标志及抗原决定簇的研究、细胞抗原表达、免疫功能测定、细胞分选和鉴定、基因表达蛋白检测、细胞内细胞因子鉴定等多个研究领域，在市场上应用极为广泛。
流式细胞术原理
利用流式细胞术快速的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选，主要通过几个步骤：制备单细胞悬液，用特异性荧光染料标记的抗体进行染色，经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室，在鞘液的包裹下细胞呈单行排列，依次通过检测区域，在激光束的照射下细胞会产生散射光和激发荧光。这两种信号会同时被光电倍增管( PMT) 接收。接收后可转换为电信号，通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号，进行分析。
常见问题及分析：
1. 细胞无染色或弱染色
细胞自发荧光较高：改变抗体的荧光染料形式。避开与自发荧光相同发射光的染料；
荧光染料淬灭：荧光抗体和荧光抗体染色后的样本都应该避光保存；
激光器性能异常：使用流式细胞仪设定&跟踪微球，以检查激光的校准和功能；
数据过度补偿：利用单染色对照和荧光减一对照为每次实验设定补偿；
2. 高背景或存在非特异性染色
二抗/试剂存在非特异性结合：滴定二抗，使本底降至程度，阻断Fc受体，确保使用已经被高度认可无非特异性的二抗；
抗体浓度过高：更改抗体的用量；
染色时间太长：根据实验细胞表达，优化抗体浓度和孵育时间；
洗涤不充分：增加染色后的洗涤次数；
3. 染色异常情况
使用同型对照浓度不对：使用与检测抗体浓度相同的同型对照；
使用同型对照来自不同的厂家：使用与实验抗体同一厂家生产的同型对照；
固定/破膜液影响细胞固定：调整FSC/SSC电压，使细胞处于可视范围之内。
义翘神州提供流式细胞检测技术服务，服务优势：
? 具有 20,000 次以上流式抗体筛选鉴定经验及多年流式诊断抗体研发经验，在实验方案设计、样品制备、数据分析等方面确保科学性、准确性和可靠性;
? 拥有 1,000 余株自产精品流式抗体，覆盖细胞膜、胞内、核内及分泌抗原；
? 自产 Annexin V/7-AAD 凋亡检测试剂盒，并储备多种流式检测常用试剂，大大节约购买试剂的等待时间和实际费用；
? 可以提供近 200 种细胞系选择，省去细胞样本寄送过程中的风险，并可以提供健康人外周血细胞对照品。
流式细胞检测服务内容：
①细胞表型检测（2-4个工作日 ）
(T/B/NK/Treg免疫分型分析等)
处理样本类型: 组织、外周血、细胞系
②CBA细胞因子检测（2-4个工作日 ）
处理样本类型: 血清、细胞培养上清、组织蛋白
③细胞活性检测（2-4个工作日 ）
处理样本类型: 细胞系、外周血、组织细胞
④细胞凋亡检测（2-4个工作日 ）
处理样本类型: 细胞系、外周血、组织细胞
⑤细胞增殖检测（2-4个工作日 ）
处理样本类型: 细胞系、外周血、组织细胞
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