什么是嵌合抗体?嵌合抗体是一个物种(如小鼠)的可变区和另一个物种(如人类)的恒定区而组成的结构性嵌合体。当开发治疗性单克隆抗体(mAb)时,嵌合抗体是降低免疫原性和增加血清半衰期的必要过程。

 

研究人员可以将一个物种的恒定区换成另一个物种的,并且可以在同一个物种内将一个亚型换成另一个亚型。然而,这一过程并不是那么简单,可能极具挑战性。

 

义翘神州提供嵌合抗体的构建及生产服务,涵盖人、小鼠、兔、大鼠、犬等。客户只需提供抗体全长序列或可变区基因序列,我们终交付高质量的嵌合抗体。技术随时为您服务,欢迎咨询。

 

 

构建人鼠嵌合抗体主要包括:克隆鼠抗体可变区基因,钓取人抗体恒定区基因,拼接鼠抗体可变区基因与人抗体恒定区基因以及构建载体和宿主细胞。

 

为什么要构建人鼠嵌合抗体?

 

构建人鼠嵌合抗体是为了提高其分子量和通透性,以更好地发挥作用,此外,这种抗体还可以渗透力强,具有治疗作用。但是,由于亲和力较低,大多数不适合单独使用于临床治疗。为了改善效果,人们把Fab抗体改造成嵌合F(ab')2抗体,提高了其分子量,其药代动力学也有所改善,取得了一定的治疗效果。

 

人鼠嵌合抗体基本原理是从分泌某种鼠单抗的杂交瘤细胞基因组中分离并鉴定出重排的功能性鼠VL(轻链可变区)和VH(重链可变区),经过基因重组分别与人的CL(轻链恒定区)和CH(重链恒定区)区基因按照一定的方式相拼接,克隆到表达载体中构建鼠/人轻重链基因表达载体,并转入适当的宿主细胞表达来制备特异性嵌合抗体。

 

 

人鼠嵌合抗体有以下特点:

 

①不仅保留了亲本鼠抗体的高特异性和亲和力,而且使鼠源性成分减少 70%左右;

 

②其人源Fc 段能有效介导生物学效应功能,如抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(Antibody dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)、补体依赖性细胞毒作用(Complement dependent cytotoxicity,CDC)等;

 

③能自由地选择抗体的型、亚型、类、亚类、大小、结构域及添加糖基化位点等,以利用其不同的生物学特点及理化特性;

 

④由高效真核表达载体和人抗体恒定区组成的嵌合抗体表达“盒子”可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区,缩短操作和研制周期;

 

⑤操作相对简单。