噬菌体展示技术是一种研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-肽和蛋白质-DNA 相互作用的实验室技术,它使用噬菌体(感染细菌的病毒)将蛋白质与编码它们的遗传信息联系起来。 在这种技术中,将编码目标蛋白质的基因插入噬菌体外壳蛋白基因中,使噬菌体在其外部展示蛋白质,同时在其内部包含蛋白质的基因,从而在基因型和表型之间建立联系。 然后可以针对其他蛋白质、肽或 DNA 序列筛选这些展示噬菌体,以检测展示蛋白质与那些其他分子之间的相互作用。 通过这种方式,可以在称为体外选择的过程中筛选和扩增大型蛋白质库,这类似于自然选择。

 

噬菌体展示中常用的噬菌体是 M13 和 fd 丝状噬菌体,但也使用了 T4、T7 和 λ 噬菌体。

 

 

噬菌体展示技术局限性:

①在噬菌体展示过程中必须经过细菌转化、噬菌体包装,有的展示系统还要经过跨膜分泌过程,大大限制了所建库的容量和分子多样性;

②不是所有的序列都能在噬菌体中获得很好的表达,有些蛋白质功能的实现需要折叠、转运、膜插入和络合,导致在体内筛选时需外加选择压力。例如,在噬菌体展示文库试验中,由于部分未折叠的蛋白在细菌中很容易被降解,因此,必须小心控制条件,以保证在噬菌体表面展示的文库没有降解;

③噬菌体展示文库一旦建成,很难再进行有效的体外突变和重组,进而限制了文库中分子遗传的多样性;

④由于噬菌体展示系统依赖于细胞内基因的表达,所以,一些对细胞有毒性的分子如生物毒素分子,很难得到有效表达和展示。

 

 

义翘神州提供——噬菌体抗体库技术平台

噬菌体抗体库开发技术包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤,义翘神州利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测,筛选的成功率达到90%,可根据客户的特殊需求构建不同物种的噬菌体抗体库,并提供全面高效的抗体发现服务。

 噬菌体展示库构建和筛选的流程图 .png


噬菌体抗体库开发服务套餐一览:

 

1、小鼠噬菌体抗体库构建服务:

周期:8-10周 (不包括免疫)

①2种小鼠免疫方案:快速15天,常规7-11周;

②同时覆盖Kappa和Lambda两种轻链亚型;

③鼠单抗人源化改造。

 

2、兔噬菌体抗体库构建服务:

周期:8-10周 (不包括免疫)

①2种兔子免疫方案:快速33天,常规7-9周;

②同时覆盖Kappa和Lambda两种轻链亚型;

③成功开发2800多个兔单抗产品;

④亲和力10?10~10?12M。

 

3、CAR候选分子发现服务

周期:8-10周 (不包括免疫)

①多个种属选择:小鼠、兔、人等;

②高效、灵活、方便的噬菌体展示形式:scFv、Fab等;

③多样的淘洗策略:固相、液相、细胞淘洗等;

④前期介入检测:ELISA、FACS等。

 

 

4、抗独特型单抗制备服务

周期:8-10周 (不包括免疫)

①高亲和力、高特异性;

②提供抗原中和、非中和及药物靶标复合物三种类型的抗独特型抗体;

③一站式抗原设计合成、抗体制备、ELISA试剂盒开发服务。

 

5、天然全人源抗体筛选服务

周期:8周

①超大库容的天然全人源抗体库构建经验;

②成熟的抗体功能评价平台;

③一站式开发服务。

 

6、WB/IHC单抗开发服务

周期:8-10周 (不包括免疫)

①亲和力高;

②信噪比好,特异性高;

③库容大,多样性好。

 

更多噬菌体抗体库开发服务详情尽在https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display