硫氧还蛋白（Thioredoxins）是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶，它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白A(TrxA), 分量为11.6kDa，来源于大肠杆菌。

 

TrxA标签独特的优点是它的热稳定性。TrxA本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化，而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。TrxA也具有极好的促溶效率，用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从12%提高至95%。

 

下面是针对trx标签常见问答解析：

 

 

①trx标签蛋白序列

 

MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG

 

②带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性

 

有可能的，trx标签是比较大的融合标签，有20多KDa，非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。

一般为了不影响蛋白的功能，会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点，比如肠激酶的位点DDDDK，把trx标签去除掉。

 

③TRX标签蛋白怎么纯化

 

一般这个载体中都会有His 标签，直接用镍柱纯化即可

 

④常见的蛋白标签有哪些？有什么特点？

 

常见的蛋白标签有His-Tag、FLAG-Tag、HA-Tag、Myc-Tag、SUMO-Tag……

 

His-Tag

主要应用：蛋白纯化优选，也可用于检测。

特点：

? 分子量小，不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。

? 可在非离子型表面活性剂存在/变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。

? 可应用于多种表达系统，纯化的条件温和。

? 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。

? 免疫原性相对较低。

 

FLAG-Tag

主要应用： 广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域，在真核表达系统中表达效率更高。

特点：

? 分子量小，不影响融合蛋白功能，比同类标签更具亲水性。

? 目的蛋白可直接通过FLAG标签进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。

? 可以被抗FLAG抗体所识别，便于通过WB、ELISA等方法对含有FLAG标签的融合蛋白进行检测、鉴定。

? 融合在目的蛋白N端的FLAG标签，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。

 

 

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