什么是重组蛋白？

 

重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功率。

 

融合蛋白和重组蛋白的区别

1、重组蛋白

重组蛋白是指应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点，现已被广泛采用。

2. 融合蛋白

融合蛋白是指通过重组DNA技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连，这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。

融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念，融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点，现已被广泛采用。融合蛋白又称标签（Tag），常用的His、GST等。

 

总结：在生物制药领域，重组蛋白具有较高的活性和纯度，更易吸收，安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。

 

为了生产重组蛋白，基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。

 

获取重组蛋白的基本步骤：

 

1.目标基因的扩增。

2.插入克隆载体。

3.亚克隆到表达载体中。

4.转化到蛋白表达宿主中(细菌(大肠杆菌)、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒-昆虫细胞系统)。

5.重组蛋白鉴定试验(Western blot或荧光)

6.大规模生产。(大规模发酵)

7.分离和纯化。

 

需要考虑多种因素：

1.选择哪个宿主系统？

2.如何分离和纯化重组蛋白？

 

选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易，应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素：

 

? 膜结合

? 溶解度

? 单或多结构域

? 大小(分子量)

? 表达位置

 

对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说，重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务，例如义翘神州(参考重组蛋白生产的详细服务清单）

 

义翘神州提供重组蛋白和融合蛋白等相关信息，详情可以关注

融合蛋白：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein

重组蛋白生产：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production