噬菌体展示技术是一种研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-肽和蛋白质-DNA 相互作用的实验室技术,它使用噬菌体(感染细菌的病毒)将蛋白质与编码它们的遗传信息联系起来。 在这种技术中,将编码目标蛋白质的基因插入噬菌体外壳蛋白基因中,使噬菌体在其外部展示蛋白质,同时在其内部包含蛋白质的基因,从而在基因型和表型之间建立联系。 然后可以针对其他蛋白质、肽或 DNA 序列筛选这些展示噬菌体,以检测展示蛋白质与那些其他分子之间的相互作用。 通过这种方式,可以在称为体外选择的过程中筛选和扩增大型蛋白质库,这类似于自然选择。
噬菌体展示技术原理:
噬菌体展示技术是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下,使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达,融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性,以利于靶分子的识别和结合。肽库与固相上的靶蛋白分子经过一定时间孵育后,洗去未结合的游离噬菌体,然后以竞争受体或酸洗脱下与靶分子结合吸附的噬菌体,洗脱的噬菌体感染宿主细胞后经繁殖扩增,进行下一轮洗脱,经过3轮~5轮的“吸附-洗脱-扩增”后,与靶分子特异结合的噬菌体得到高度富集。所得的噬菌体制剂可用来做进一步富集有期望结合特性的目标噬菌体。
噬菌体抗体库开发的技术路线:
基于噬菌体展示抗体库构建和筛选的知识,义翘神州能为客户提供个性化的抗体定制服务,包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属的抗体发现服务。
噬菌体抗体库开发技术包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤,义翘神州利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测,筛选的成功率达到90%,可根据客户的特殊需求构建不同物种的噬菌体抗体库,并提供全面高效的抗体发现服务。
义翘神州——噬菌体抗体库开发服务套餐一览:
①小鼠噬菌体抗体库构建服务
周期:8-10周 (不包括免疫)
2种小鼠免疫方案:快速15天,常规7-11周;
同时覆盖Kappa和Lambda两种轻链亚型;
鼠单抗人源化改造。
②兔噬菌体抗体库构建服务
周期:8-10周 (不包括免疫)
2种兔子免疫方案:快速33天,常规7-9周;
同时覆盖Kappa和Lambda两种轻链亚型;
成功开发2800多个兔单抗产品;
亲和力10?10~10?12M。
③CAR候选分子发现服务
周期:8-10周 (不包括免疫)
多个种属选择:小鼠、兔、人等;
高效、灵活、方便的噬菌体展示形式:scFv、Fab等;
多样的淘洗策略:固相、液相、细胞淘洗等;
前期介入检测:ELISA、FACS等。
④抗独特型单抗制备服务
周期:8-10周 (不包括免疫)
高亲和力、高特异性;
提供抗原中和、非中和及药物靶标复合物三种类型的抗独特型抗体;
一站式抗原设计合成、抗体制备、ELISA试剂盒开发服务。
⑤天然全人源抗体筛选服务
周期:8周
超大库容的天然全人源抗体库构建经验;
成熟的抗体功能评价平台;
一站式开发服务。
⑥WB/IHC单抗开发服务
周期:8-10周 (不包括免疫)
亲和力高;
信噪比好,特异性高;
库容大,多样性好。
更多噬菌体抗体库开发服务平台详情可以查看:https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display