嵌合抗体是一个物种（如小鼠）的可变区和另一个物种（如人类）的恒定区而组成的结构性嵌合体。当开发治疗性单克隆抗体（mAb）时，嵌合抗体是降低免疫原性和增加血清半衰期的必要过程。

 

研究人员可以将一个物种的恒定区换成另一个物种的，并且可以在同一个物种内将一个亚型换成另一个亚型。然而，这一过程并不是那么简单，可能极具挑战性。

 

 

嵌合抗体的制备流程：

 

①处死免疫成功的小鼠后，摘取小鼠脾脏，分离 B 细胞。将骨髓瘤细胞与B细胞融合，形成杂交瘤细胞，并筛选产生抗原特异性IgG的阳性克隆。

②从该克隆中分离编码小鼠VH和VL的DNA序列，并且从人细胞中分离编码人免疫球蛋白恒定区的DNA序列。通过基因工程构建小鼠/人嵌合基因，并将其转染至哺乳动物细胞。

③选择高表达嵌合IgG的克隆，并从培养上清液中纯化IgG。

 

 

人鼠嵌合抗体特点：

①不仅保留了亲本鼠抗体的高特异性和亲和力，而且使鼠源性成分减少 70%左右；

②其人源Fc 段能有效介导生物学效应功能，如抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（Antibody dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）、补体依赖性细胞毒作用（Complement dependent cytotoxicity，CDC）等；

③能自由地选择抗体的型、亚型、类、亚类、大小、结构域及添加糖基化位点等，以利用其不同的生物学特点及理化特性；

④由高效真核表达载体和人抗体恒定区组成的嵌合抗体表达“盒子”可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；

⑤操作相对简单。

 

嵌合抗体的应用

嵌合单克隆抗体在治疗和免疫测定中具有重要的应用。在免疫组织化学或ELISA等检测，转换抗体恒定区以匹配宿主或二抗的种属可以显著降低背景染色。

 

美国FDA批准利妥昔单抗后，其他两种嵌合抗体（西妥昔单抗和地努妥昔单抗）也已进入了肿瘤适应症市场。其中，西妥昔单抗是通过利用纯化的EGFR免疫小鼠，然后将小鼠抗体225的恒定区替换成人IgG1的恒定区。命名为C225的嵌合分子显示出比亲代小鼠抗体高约5倍的亲和力，有效抑制了肿瘤生长。地努妥昔单抗也是从鼠单抗开发的。嵌合分子（ch14.18），也是人IgG1，显示出同小鼠IgG2a抗体相同的结合能力，但是，当使用人的效应细胞时，ADCC显示出比亲代小鼠抗体高50至100倍。